image/svg+xml153Volumen XXV, Número 2Revista de Ciencias Biológicas y de la Salud http://biotecnia.unison.mxUniversidad de SonoraISSN: 1665-1456153Actividad antifúngica del aceite esencial y extracto acuoso del orégano Lippia palmeriW. sobre Fusarium oxysporumy Thanatephorussp.Antifungal activity of the essential oil and aqueous extract of oregano Lippia palmeriW. on Fusarium oxysporum and Thanatephorus sp.Genesis Valenzuela-Quintero*1, María Magdalena Ortega-Nieblas†1, María Guadalupe Burboa-Zazueta1, Luis Enrique Gutiérrez-Millán1, Juan Pedro López-Córdova2, María Eugenia Rentería-Martínez2, José Jiménez-León2, Gilberto Curlango-Rivera3y José Cosme Guerrero-Ruíz21 Departamento de Investigaciones Científicas y Tecnológicas. Universidad de Sonora. Avenida Luis Donaldo Colosio s/n Edificio 7G, Centro, C. P. 83000, Hermosillo, Sonora, México; correo-e: genesis.valqu12@gmail.com, maria.burboa@unison.mx, luis.millan@unison.mx 2 Departamento de Agricultura y Ganadería. Universidad de Sonora. Carretera 100 a Bahía de Kino km. 21.5, Hermosillo, Sonora, México; correo-e: pedro.lopez@unison.mx, eugenia.renteria@unison.mx, jose.jimenez@unison.mx, cos-meguerrero@hotmail.com 3 Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada. Carretera Ensenada-Tijuana No. 3918, Zona Playitas, C.P. 22860, Ensenada, Baja California, México; correo-e: curlango@arizona.edu *Autor para correspondencia: Genesis Valenzuela QuinteroCorreo electrónico: genesis.valqu12@gmail.comRecibido: 2 de diciembre de 2022Aceptado: 8 de marzo de 2023RESUMENEn los últimos años en la agricultura ha existido una cre-ciente necesidad de disminuir y sustituir el uso de químicos sintéticos por la aplicación de extractos vegetales y aceites esenciales en los cultivos para el control de ftopatógenos. El objetivo de este trabajo fue evaluar in vitroel efecto del aceite esencial y extracto acuoso de la especie vegetal Lippia palmeri W. colectada en Sonora, México.La actividad antifúngica se realizó mediante el método de difusión en agar sobre los hongos ftopatógenosFusarium oxysporumyThanatephorus sp. Se determinó el porcentaje de inhibición del crecimiento micelial de las dosis de aceite esencial 0, 100, 150, 200, 250 y 300 µL/mL y del extracto acuoso lioflizado 0, 0.10, 0.15, 0.20, 0.25 y 0.30 g, el cual fue evaluado mediante un análisis de varianza (ANOVA) y posterior comparación de medias de Tukey (p ≤ 0.05). El aceite esencial y el carvacrol de Lippia palmeri W.lograron inhibir al 100 % el crecimiento de Fusarium oxysporuma diferencia de Thanatephorus sp.que obtuvo entre 90 y 100 %. El extracto acuoso inhibió según la dosis aplicada a F. oxysporum entre el 20 y 100 % y para Thenatephorus sp.fue de 10 a 100 %.Palabras claves: Fusarium oxysporum, Thanatephorus sp.,Lippia palmeri W., orégano, antifúngico.ABSTRACTIn recent years there has been a growing need in agriculture to reduce and replace the use of synthetic chemicals with the application of plant extracts and essential oils in crops for the control of phytopathogens. The objective of this work was to evaluate the in vitroefect of the essential oil and aqueous extract of the plant species Lippia palmeriW. collected in the state of Sonora, Mexico. The antifungal activity was determined by the agar difusion method on the Fusarium oxysporumand Thanatephorus sp. phytopathogenic fungi. The percentage of inhibition of mycelial growth of the dose of essential oil 0, 100, 150, 200, 250 and 300 µL/mL and of the lyophilized aqueous extract 0, 0.10, 0.15, 0.20, 0.25 and 0.30 g will be decreased, which was evaluated through an analysis of variance (ANOVA) and its subsequent Tukey comparison of means (p ≤ 0.05). The essential oil and carvacrol of Lippia palmeri W. managed to inhibit 100 % of the growth of Fusa-rium oxysporum, unlike Thanatephorus sp., which obtained between 90 and 100 %. Depending on the dose applied, the aqueous extract inhibited F. oxysporumbetween 20 and 100 % and Thenatephorus sp. it was from 10 to 100 %. Key words:Fusarium oxysporum, Thanatephorus sp,Lippia palmeri,oregano, antifungi.INTRODUCIÓNEn ambientes propicios, los hongos ftopatógenos del suelo pueden traer consigo pérdidas económicas catastrófcas al atacar entre el 60 % y 100 % de la superfcie de siembra (Rivera, 2009), estos se localizan naturalmente en suelos agrícolas, pueden encontrarse una o diversas especies, pro-vocando podredumbre en las raíces y cuello de las plantas, lo que puede afectar al productor al hacer un diagnóstico incorrecto (Fernández-Herrera et al., 2013). Fusarium oxysporum y Thanatephorus cucumeris (Ana-morfo: Rhizoctonia solani)son hongos que afectan a diversos cultivos alrededor del mundo y tienen una gran cantidad de hospederos incluyendo plantas silvestres, cultivos y malezas (Ajayi‐ Oyetunde y Bradley, 2018; CABI, 2020). En el estado de Sonora se ha registrado la presencia de los hongos F. oxys-porum y T. cucumeris en cultivos importantes para la región, como lo son el chile, tomate, garbanzo, sandía, melón, papa y vid, entre otros (Padilla et al., 2006; Silva-Rojas et al., 2009; Ramírez et al.,2012; Meza-Möller et al., 2014).En las últimas décadas los fungicidas más utilizados en agricultura, para el control de enfermedades originadas por hongos generalmente, se clasifcan dentro de los siguientes DOI: 10.18633/biotecnia.v25i2.1903
image/svg+xml154Volumen XXV, Número 2Valenzuela-Quintero et al: Biotecnia / XXV (2): 153-158 (2023)154grupos: fosforados, clorados, carbamatos, nitroderivados y derivados aromáticos, que tienen acción protectora y de pre-vención (Almandoz et al., 2000; Martínez-Romero et al., 2008; Cantrell et al., 2012; Murillo et al., 2013). El impacto negativo que estos fungicidas han tenido para la naturaleza y para el consumidor, han forzado a la comunidad científca a buscar y proponer nuevas alternativas naturales y libres de residuos tóxicos (Sayuri et al., 2018). Siempre y cuando sustituyan los fungicidas químicos sintéticos con el uso de aceites esencia-les para inhibir cualquier tipo de organismo ftopatógenos (Silva-Marrufo y Marín-Tinoco, 2021; Marín-Tinoco et al., 2021), como se planteó en esta investigación.La naturaleza química de los aceites esenciales y extrac-tos acuosos los hacen ser una excelente alternativa como biocontroladores de ftopatógenos; éstos son extraídos de las plantas por diferentes procesos y pueden tener entre 50 y 300 compuestos químicos, de los cuales uno o dos serán los de mayor porcentaje en la composición. Los aceites esenciales están formados principalmente por terpenos, monoterpenos y sesquiterpenos, además de sustancias azufradas y nitroge-nadas; por su parte, los extractos acuosos están compuestos principalmente por alcaloides, taninos, quinonas, cumarinas, compuestos fenólicos y ftoalexinas (Stashenko, 2009; Ruíz et al., 2015; Wangkhem et al., 2019). Recientemente, Romero-Bastidas et al. (2020) han apli-cado el extracto etanólico de orégano en semillas de garban-zo, como inhibidor de Fusarium oxysporum y Fusarium solani, obteniendo resultados positivos al concluir que L. palmeri puede ser una alternativa natural para el control efcaz de los agentes mencionados anteriormente. El objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad antifúngica del aceite esen-cial y extracto acuoso de orégano Lippia palmeriW. sobre los hongos patógenos Fusarium oxysporum y Thanatephorus sp.de manera in vitro.MATERIALES Y MÉTODOSMaterial vegetal Las hojas de las plantas de orégano (Lippia palmeriWatson), se colectaron en la época de foración en el mes de septiembre, en el campo experimental del Departamento de Agricultura y Ganadería de la Universidad de Sonora, localizado en el km. 21 de la carretera Hermosillo a Bahía de Kino, Sonora, México (29.01595217894536, -111.13341050793869).Extracción del aceite esencial y extracto acuoso Se establecieron dos tipos de bioensayos, uno para aceite esencial y otro para el extracto acuoso. Para ambos bioensa-yos se dejaron secando las hojas de cada una de las plantas de orégano colectadas a temperatura ambiente y a la som-bra, una vez que el material vegetal fue secado las hojas se almacenaron en bolsas de papel. Para realizar la extracción del aceite esencial se siguió el método de arrastre al vapor utilizando 100 g de hojas de L. palmeri durante 4 h con ayuda de un equipo Clevenger (Win-zer®, USA). El aceite esencial fue separado de la fase acuosa por medio de decantación y posteriormente se le agregó sulfato de sodio anhidro para eliminar la humedad del aceite esencial; ya extraído el aceite esencial se conservó en viales ámbar a - 4 ºC.Para el extracto acuoso se pesaron 70 g de hoja seca, se colocaron en un vaso de precipitado con agua destilada y se agitó durante 24 h; posteriormente se fltró por gravedad y el fltrado fue lioflizado en un equipo (LABCONCO FreeZone, USA). El extracto acuoso restante no lioflizado fue conserva-do a - 4 °C. Análisis de cromatografía de gases/masas del aceite esencial y el extracto acuoso de orégano cultivado (Lip-pia palmeriW.) La identifcación y cuantifcación de los compuestos que forman el aceite esencial y extracto acuoso se determinaron utilizando un cromatógrafo de gases (Agilent Technologies 7890, USA) acoplado a un espectrómetro de masas, cuádru-polo simple (Agilent 5975C, USA), con una fuente de ioniza-ción de impacto electrónico a 70 eV. Se utilizó una columna capilar HP-5MS UI de 30 m de longitud, 0.25 mm de diámetro interno y 0.25 µm de espesor de película, usando helio como gas portador, con un fujo de 1 mL/min. El modo de inyección fue en modo split en una relación de 100:1; el volumen de inyección fue de 1 µL; el aceite esencial y extracto acuoso lioflizado se diluyeron en una proporción 1:50, con metanol grado HPLC ≥ 99.9 %. Las temperaturas de la interfase y de la fuente fueron 150 °C y 200 °C respectivamente. El programa de temperatura inició a 50 °C por 5 min, seguidos de una rampa de calentamiento a razón de 8 °C/min hasta 300 °C, manteniendo esta temperatura por 5 min; el tiempo total de corrida fue de 41.25 min. La adquisición de los datos se llevó a cabo en modo scan en un rango de masas de 40 - 450 m/z. En el software de análisis de datos MSD ChemStation E.02.02.1431; la identifcación de los compuestos se llevó a cabo por su espectro de masas utilizando el programa 5975TAD Data Analysis vinculado a la Librería NIST 2011.Bioensayo de la actividad de aceites esencial y el extracto acuoso del oréganoSe utilizaron los aislados registrados en el GenBank, FONRB01 con número de acceso MW712740 de Fusarium oxysporum y el aislado GVQO1 con número de acceso MZ683160 deThanatephorus sp., los cuales fueron aislados e identifcados en el Laboratorio de Biología Molecular y el Laboratorio de Fitopatología del Departamento de Agricultura y Ganadería de la Universidad de Sonora.Siguiendo la metodología utilizada por Barrera-Necha et al. (2008) los aceites esenciales y sus compuestos fueron disueltos con ayuda de tween 20, se mezclaron por medio de agitación en matraces con 250 mL de medio de cultivo PDA esterilizado; las dosis utilizadas de aceite esencial, previamen-te solubilizado en DMSO (dimetil-sulfóxido), fueron: 0, 100, 150, 200, 250 y 300 µL/mL, utilizando al compuesto timol en dosis de 100 y 300 µL/mL como control positivo y el propio medio PDA como control negativo.Para el extracto acuoso lioflizado se añadieron los polvos vegetales del orégano al
image/svg+xml155Volumen XXV, Número 2Valenzuela-Quintero et al: Actividad antifúngica del aceite esencial y extracto / XXV (2): 153-158 (2023)155PDA en dosis de 0.10, 0.15, 0.20, 0.25 y 0.30 g, también para el extracto acuoso se utilizaron el timol y el PDA como contro-les; las diferentes concentraciones y sus controles se vaciaron en cajas Petri de 90 x 14 mm. Un disco de agar de 7.5 mm del cultivo del patógeno se colocó en el centro de cada caja con los tratamientos; todas las cajas Petri con tratamiento, se pasaron a una incubadora a 27 °C por 7 d para Thanatephorus sp.y 13 d para F. oxysporum. El crecimiento del micelio o diámetro de la colonia fue medido de forma diaria utilizando un vernier. Con los datos de diámetro de crecimiento se cal-culó el porcentaje de inhibición del crecimiento micelial con respecto al tratamiento testigo (C.M.R.T.) mediante la fórmula (Barrera-Necha, 2009):C.M.R.T. (%) = (TCT-TCt/TCT) x100Donde: TCT =tasa de crecimiento en el testigo y TCt = tasa de crecimiento del tratamiento.Análisis estadísticoEl diseño fue de bloques completamente al azar. Los resul-tados del porcentaje de inhibición del crecimiento micelial fueron transformados con la raíz cuadrada de arcoseno y evaluados mediante un análisis de varianza de una vía de clasifcación. Posteriormente se realizó una comparación de medias mediante la prueba de Tukey, usando el paquete estadístico JMP versión 5.0.1 (SAS Institute, 2002).RESULTADOS Y DISCUSIÓNEl aceite esencial del orégano cultivado presentó 38 compuestos. El componente que se encontró con mayor abundancia fue timol (32 %), seguido por cariofleno (21.7 %) que en conjunto constituyen el 53.7 % del total. Otros compuestos abundantes fueron carvacrol y o-cimeno (ambos 5.56 %), γ-terpineno (5.00 %), óxido de cariofleno (4.32 %), 4-tert-butylcatechol (2.47 %), 3-tert-butil-4-metoxi fenol (1.84 %), α-cariofleno (1.75 %), β-mirceno (1.36 %) y acetato de timol (1.31 %). El 22.69 % restante lo conformaron 26 compuestos que su contenido es en trazas desde 1.19 al 0.01 %. Estos resultados fueron comparados con el estudio realizado Ortega-Nieblas et al. (2011) en el que determinaron los componentes de Lippia palmeriproveniente de dos localidades silvestres ubicadas en Álamos y del Puerto del Orégano, Sonora; el del presente estudio mostró similitud en la presencia de compuestos con ambos aceites: α-pineno, α-felandreno, α-terpineno, o-cimeno, γ-terpineno, borneol, timol, carvacrol, cariofleno, alo-aromadendreno, β-bisabo-leno, espatulenol. Algunos autores, concuerdan que los que contienen carvacrol, timol y o-cimeno, son los responsables de actividad insecticida, bactericida, fungicida y antiviral (Aligiannis et al., 2001; Salgueiro, 2003; Radudiene, 2005; Camilo et al., 2007; Bothelo et al., 2007). Generalmente los estudios que se relacionan con la composición del aceite de orégano son enfocados en el Origanum vulgare, demostran-do que el rendimiento y composición de estos se relacionan directamente con el estrés ambiental al que esté sometida la planta, su geolocalización y del método de extracción utiliza-do (Ávila et al., 2010).El cromatograma del extracto acuso del orégano cultiva-do, identifcó 42 compuestos. El compuesto de porcentaje mayoritario fue timol (12.56 %), seguido del o-cimeno (11.58 %), furfural (9.25 %) y levoglucosano (5.49 %), conformando estos cuatro compuestos el 38.8 % del total. El resto fueron 38 compuestos con concentraciones bajas, entre los que se encuentra el ribotol (1.91 %), dimetil melato (1.67 %) y el áci-do benzoico (1.52 %), conocidos por sus propiedades antimi-crobianas y antifúngicas. Al igual que en el aceite esencial del orégano, en el extracto acuoso se encontraron compuestos que están registrados en la literatura con actividad biológica importante. Actividad biológica de los aceites esenciales sobre Fusa-rium oxysporum y Thanatephorus sp.Se establecieron las dosis del aceite esencial para inhibir a F. oxysporum y Thanatephorus sp. En los resultados obtenidos para F. oxysporum no se observaron diferencias signifcativas entre las dosis utilizadas (p ≤ 0.05). Se obtuvieron resulta-dos relevantes en los 5 tratamientos de aceite esencial del orégano al igual que con el carvacrol como control positivo, mostrando una fuerte actividad biológica en contra del hon-go, al obtener una inhibición total e impedir el crecimiento micelial en cualquiera de sus dosis aplicadas. Estos resul-tados coinciden con lo reportado por Wogiatzi et al. (2009) quienes encontraron que los biotipos de O. vulgarericos en timol y carvacrol inhibieron satisfactoriamente el crecimien-to micelial de F. oxysporum. Los resultados encontrados en nuestra investigación son de gran relevancia, considerando la importancia de encontrar alternativas naturales para erradicar a F. oxysporum, ya que éste se encuentra entre los hongos ftopatógenos más importantes a nivel mundial por los daños causados en cultivos y que además puede afectar la salud humana (Dean et al., 2012)Para Thanatephorus sp.la dosis de 100 µL/mL fue la que tuvo menor efecto de inhibición entre 90 y 93 %, pero a me-dida que se iba incrementado la dosis de aceite esencial, este tenía un control in vitro hasta llegar a un 99 y 100 % de in-hibición en el transcurso de los 7 d (Figura 1), se encontraron diferencias signifcativas (p ≤ 0.05) entre los tratamientos de 100 y 150 µL/mL respecto a los demás. Con la tendencia en la baja del crecimiento micelial nos indica que a mayor cantidad de aceite esencial se tiene una mayor sensibilidad por parte de Thanatephorus sp. al tener una inhibición total en el crecimiento del micelio. Siramon et al. (2013) trabajaron de forma in vitro con el aceite esencial de eucalipto rojo con-tra Chaetomium globosum, Fusarium oxysporum, Aspergillus niger, Thanatephorus cucumerisy Rhizopus oryzae, este aceite esencial tuvo una inhibición inducida de entre el 84 y 100 % para F. oxysporum y T. cucumeris. Actividad biológica de los extractos acuosos sobre Fusa-rium oxysporum y Thanatephorus sp.Se observaron diferencias signifcativas (p ≤ 0.05) en los tratamientos aplicados para la inhibición de F. oxysporum utilizando extracto acuoso del orégano, las dosis con mejor
image/svg+xml156Volumen XXV, Número 2Valenzuela-Quintero et al: Biotecnia / XXV (2): 153-158 (2023)156resultado de 0.25 g y 0.30 g con una inhibición entre el 60 % y 90 % las dosis más bajas que fueron de 0.10 a 0.15 g inhibieron entre el 20 % y 60 % el crecimiento micelial (Figura 2); en otros estudios se han experimentado con extractos acuosos evaluando el potencial antifúngico,Jawadayn-Talib et al.(2020) probaron diferentes partes de hojas y raíces de Chenopodium albumsobre Alternaria alternata, Fusarium solani, Rhizoctonia solani, Pythium aphanidermatumy Sclerotinia sclerotium, utilizando las concentraciones de 0, 5, 10 y 15 % de extracto de acuoso de hojas y raíces, concluyendo que este tenía una reducción signifcativa del crecimiento del micelio de hongos teniendo una inhibición entre el 15 y 100 %. Al igual que con F. oxysporum se utilizó el extracto ac-uoso de L. palmeri para inhibir a Thanatephorussp. (Figura 3) se pudo observar que en las primeras 24 h, fue cuando las dosis tuvieron mejor respuesta. La dosis de 0.30 g tuvo una inhibición entre 58 y 100 %, mientras que las dosis más bajas de 0.10 y 0.15 g inhibieron entre 10 y 38 % existiendo diferencias signifcativas entre los tratamientos, los controles positivos y negativo. Se ha experimentado con extractos metanólicos deL. tridentata y Flourensia cernuasobre R. so-lani donde se inhibió entre el 100 % y 85 % respectivamente indicando que sí es posible controlar el desarrollo de hongos ftopatógenos con extractos vegetales (López-Benítez, 2005; Rodríguez-Castro et al., 2020).Figura 1. Actividad antifúngica del aceite esencial de L. palmeri en dosis de 100, 150, 200, 250 y 300 µL/mL; como control positivo carvacrol 100 y 300 µL/mL, expresada en porcentaje de inhibición del crecimiento del hongo Thanatephorussp. prueba demedias entre las diferentes concentraciones (p ≤ 0.05).Figure 1.Antifungal activity of the essential oil of L. palmeriat dose of 100, 150, 200, 250 and 300 µL/mL; as a positive control Carvacrol 100 and 300 µL/mL expressed as a percentage of inhibition of the growth of the fungus Thanatephorussp. test of means between the diferent concentrations (p ≤ 0.05).Figura 2. Actividad antifúngica del extracto acuoso lioflizado de L. palmeri en dosis de 0.10, 0.15, 0.20, 0.25 y 0.30 g en 250 mL de PDA; como control positivo carvacrol 100 y 300 µL/mL expresada en porcentaje de inhibición del crecimiento del hongo F. oxysporum.prueba demedias entre las diferentes concentraciones (p ≤ 0.05).Figure 2.Antifungal activity of the lyophilized aqueous extract of L. palmeriat dose of 0.10, 0.15, 0.20, 0.25 and 0.30 g in 250 mL PDA; as a positive control Carvacrol 100 and 300 µL/mL expressed as a percentage of inhibition of the growth of the fungus F. oxysporum. test of means between the diferent concentrations (p ≤ 0.05).
image/svg+xml157Volumen XXV, Número 2Valenzuela-Quintero et al: Actividad antifúngica del aceite esencial y extracto / XXV (2): 153-158 (2023)157En diversas investigaciones se le atribuye el efecto an-tifúngico al terpeno timol y a su isómero el carvacrol que se encuentran en los aceites esenciales y extractos acuosos en especies como O. vulgare, L. alba, L. berlandieri y L. graveolens. Se ha reportado que estos compuestos pueden afectar al hongo al alterar su estructura morfológica, retrasando y reduciendo el desarrollo al producir lisis entre la membrana y pared celular del hongo (Kordal et al., 2008). Al tener contac-to la membrana con el aceite esencial se da unapérdida de la integridad de la membrana y una disminución en la cantidad de ergosterol compuesto principal que forma la membrana de los hongos, así como una respuesta inhibitoria a la for-mación de la pared (Shreaz, 2016). Por último, igualmente se ha señalado que la expresión de algunos genes pudiera verse afectada de forma negativa, especialmente, aquéllos involu-crados en los procesos de la adhesión, desarrollo, dimorfsmo y la reproducción de esporas del hongo (D’agostino, 2019). 4. CONCLUSIONESLa cromatografía de gases/masas permitió caracterizar quí-micamente al aceite esencial y el extracto acuoso a partir de hojas de Lippia palmeriW, y evaluar su efecto antifúngico in vitro, contra hongos de importancia agrícola a nivel mundial. Los resultados evidenciaron que las dos especies de ftopató-genos F. oxysporumy Thanatephorussp. fueron inhibidos in vitro por el aceite esencial y extracto acuoso del orégano L. palmeri W., la velocidad de crecimiento micelial de Fusarium oxysporumy Thanatephorussp. se redujo acorde al aumento de las concentraciones utilizadas. La actividad biológica de L. palmeripuede jugar un importante papel actuando como bioplaguicida contra hongos ftopatógenos que habitan en el suelo gracias a sus componentes identifcados tales como: timol, carvacrol, cariofleno y o-cimeno.5. AGRADECIMIENTOSFusarium oxysporumstrain RB001 was kindly provided by Dr. Irene Ileana Ramirez Bustos.6. REFERENCIASAligiannis, N., Kalpoutzakis, E., Mitaku, S. y Chinou, I. 2001. Composition and antimicrobial activity of essential oils of two Origanumspecies. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 49: 4168-4170. DOI: 10.1021/jf001494mAlkooranee, J. T., Al-khshemawee, H. H., Kadhim Al-badri, M. A., Al-srai, M. S. y Daweri, H. H. 2020. Antifungal activity and GC-MS detection of leaves and roots parts of Chenopodium albumextract against some phytopathogenic fungi. Indian Journal of Agricultural Research. 54: 117-121. DOI:10.18805/IJARe.A-433Almandoz, J.E., Pico, V., Pérez, L., Rodríguez, F. y Parra, J. 2000. Efectividad de nuevos fungicidas para el control de Alternaria solaniEllisy Martin en el cultivo de la papa (Solanum tuberosumL.). XIX Congreso de la Asociación Latinoamericana de la Papa (ALAP). La Habana.Barrera-Necha, L. L. y García-Barrera, L. J. 2008. Actividad antifúngica de aceites esenciales y sus compuestos sobre el crecimiento de Fusariumsp. aislado de papaya (Carica papaya). Revista Científca UDO Agrícola. 8(1): 33-41. ISSN-e 1317-9152Camilo, D.E, Luz, A.M, Martínez, J.R. y Stashenko, E. 2007. Estudio comparativo de la composición química de aceites esenciales de Lippia alba provenientes de dif erentes regiones de Colombia, y efecto del tiempo de destilación sobre la composición del aceite. Scientia et Técnica. 3: 435-438. ISSN: 0122-1701Figura 3. Actividad antifúngica del extracto acuoso lioflizado de L. palmeri en dosis de 0.10, 0.15, 0.20, 0.25 y 0.30 g en 250 mL PDA, expresada en porcentaje de inhibición del crecimiento del hongoThanatephorus sp.Prueba demedias entre las diferentes concentraciones (p ≤ 0.05).Figure 3.Antifungal activity of the lyophilized aqueous extract of L. palmeriat concentrations of 0.10, 0.15, 0.20, .025 and 0.30 g in 250 mL PDA, expressed as a percentage of inhibition of the growth of the fungus Thanatephorussp. test of means between the diferent concentrations (p ≤ 0.05).
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